在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中，細(xì)胞不貼壁是一個(gè)常見且令人困擾的問題，它往往會給實(shí)驗(yàn)帶來諸多不便，影響實(shí)驗(yàn)進(jìn)行和結(jié)果的準(zhǔn)確性。當(dāng)遇到細(xì)胞不貼壁的情況時(shí)，我們可以從以下幾個(gè)方面入手，排查不貼壁的原因并找尋相對應(yīng)的解決方案。

▲貼壁細(xì)胞培養(yǎng)

支原體感染或其他微生物污染會導(dǎo)致細(xì)胞功能紊亂，影響貼壁能力；

解決方法：分離培養(yǎng)物，檢測支原體。如果發(fā)現(xiàn)支原體污染，應(yīng)丟棄培養(yǎng)物。

培養(yǎng)基pH值過高，可能導(dǎo)致細(xì)胞不適應(yīng)，影響貼壁；

解決方法：使用無菌醋酸溶液，調(diào)整pH值或充入無菌CO?以維持適宜的pH環(huán)境。

細(xì)胞傳代次數(shù)過多，可能會導(dǎo)致細(xì)胞老化，失去貼附性;

解決方法：復(fù)蘇新的細(xì)胞，使用20%血清幫助細(xì)胞復(fù)原并注意傳代接種的細(xì)胞密度和時(shí)機(jī)。

細(xì)胞接種量過低或過高，可能無法形成有效的細(xì)胞外基質(zhì)，影響貼壁；

解決方法：改變培養(yǎng)液成分，使用含有促貼壁因子的培養(yǎng)基。

細(xì)菌和真菌污染通常會導(dǎo)致培養(yǎng)基迅速變渾濁，顏色也會發(fā)生變化。

用細(xì)胞間配置的顯微鏡可以觀察到細(xì)菌和真菌的結(jié)構(gòu)，有助于早期發(fā)現(xiàn)微生物污染。

某些微生物污染會產(chǎn)生易察覺的特殊氣味，這可以幫助檢測污染。

在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，必須嚴(yán)格遵循無菌操作技術(shù)，以防細(xì)胞遭受污染。要使用新鮮且質(zhì)量達(dá)標(biāo)的培養(yǎng)基及細(xì)胞株，以此來降低污染出現(xiàn)的可能性。還需要定期對細(xì)胞狀態(tài)進(jìn)行檢查，如有需要，應(yīng)及時(shí)對細(xì)胞進(jìn)行傳代或處理異常細(xì)胞。